微生物研究技术——无菌操作技术

　  巴斯德用一个有长颈的圆底烧瓶装上肉汤，如果就这么放着，几天后肉汤便浑浊发臭了，用显微镜可以观察到里面长了许多细菌。如果把长长的瓶颈用火焰烧成弯曲状，虽然瓶口还是和外界相通，氧气可以自由出入，可是肉汤放置很长时间也不会变浑浊。如果把里面的肉汤从弯曲处往瓶口倾折，让液体接触瓶口，再让液体流回瓶中，几天后，液体又变浑发臭了。巴斯德这个实验充分说明，肉汤之所以变浑发臭，是肉汤里面的细菌繁殖造成的，如果加热杀死了肉汤里面的细菌，又不让外面的细菌进去，肉汤就不会有细菌生长。液体和瓶口接触后，因为空气中的尘埃和细菌沾在瓶口，通过肉汤进入瓶内，所以几天后会变浑发臭。而且，烧瓶尽管有弯长的颈，可是瓶口是和外界相通的，空气可以自由进入，所以可以保证里面有氧气，所以不是没有氧气而使细菌不能生长。

直到20世纪６０年代，在伦敦的一个研究所中，还一直保存着19世纪后期为否定自然发生论所用的的一些陈年肉汤，它们在70年后依然清亮如故。巴斯德这个简单但是具有说服力的著名实验，证实了微生物只能从微生物产生而不能自然地从没有生命的物质发生。从此，人们开始认识到无菌操作的重要。灭过菌的物质在适当保护下将保持无菌状态，除非有人去感染它。巴斯德奠定了这个微生物学的基本原理。

-- 巴斯德否定自然发生论的实验 --

消毒和灭菌的方法：

　  我们知道了消除微生物对外科手术和食品保藏的重要性，也明白要研究某种微生物，实现必须保证没有混杂由外界进入的不相干的其他微生物，就必须把培养微生物的环境彻底灭菌。这是无菌操作的前提。100多年来，科学家们发明了各种消毒和灭菌的方法。

在讲述这些方法之前，我们要弄清消毒和灭菌两个不同的概念。所谓消毒，是指消除附着在器具或食品中的有害的（或者引起疾病，或者使食品腐烂）微生物。但消毒不一定能消灭全部微生物。例如李斯特用石炭酸处理外科手术器械并不能杀死全部微生物。因为有的微生物比较皮实，采用过激的手段杀死它们的同时容易把器具或食品破坏掉。不过这些皮实的微生物一般不会致病，在其他条件不具备时也不易生长，保留他们影响不大。如果我们的目的是研究某一种微生物，则必须保证在我们的器具中和培养它们的基质内没有任何其他微生物混杂，这时就必须在放进要研究的某种特定微生物之前，把容器内的全部微生物杀死他们，这种处理方法就是灭菌。

其实，在人类长期生活实践中已经采用过消毒和灭菌的方法，不过在微生物学诞生前，人们只是知其然，不知其所以然罢了。例如在没有冰箱之前，我们知道在夏天把剩菜剩饭重新加热后第二天就不会馊，再如把得重病死亡者的用具全部付之一炬。这就是消毒和灭菌。